2.3.3 肺组织中HMGB1、TLR4及Trem-1蛋白表达 手术后6 h，从各组剩余10只大鼠中随机取5只，取肺组织样本，液氮处理后储存在-80 ℃冰箱中。测定时现将组织剪碎，加入裂解液匀浆30 min后4 ℃、13 000 r/min离心。采用Western blot法对组织中HMGB1、TLR4及Trem-1蛋白表达量进行检测。提取组织中总蛋白，定量电泳后，转移至硝酸纤维素膜上后，室温孵育2 h，加入兔源HMGB1、TLR4、Trem-1、β-actin单克隆抗体(稀释比例均为1 ∶ 2 000)，4 ℃低温过夜并用TBST缓冲液漂洗后加入抗兔IgG抗体(稀释比例为1 ∶ 500)，密闭孵育2 h，BCIP/NBT碱性磷酸酯酶显色。用Scion Image软件对蛋白条带进行分析，以目标蛋白与内参(β-actin)的比值进行定量分析。

    2.4 统计学方法

    采用SPSS 19.0软件进行统计学分析，计量数据以x±s表示，多组间采用单因素方差分析比较，组间两两比较使用SNK检验。当P<0.05表示差异有统计学意义。

    3 结果

    3.1 血清生化指标

    与假手术组比较，其余各组大鼠的IL-1、IL-6、TNF-α浓度均明显升高(P<0.05) ......