CIN患者HPV感染亚型特点及宫颈锥切术后HPV感染转阴相关因素的研究(1)
[摘要] 目的 探讨宫颈上皮内瘤变(CIN)患者人类乳头瘤病毒(HPV)感染亚型特点，分析宫颈锥切术后HPV感染转阴的相关因素。 方法 选择本院接受两癌筛查HPV阳性的544例妇女为研究对象，回顾性分析HPV感染亚型分布特点，经病理确诊的CIN2和CIN3的患者采取宫颈锥切术治疗，探讨术后HPV感染转阴的相关因素。 结果 前3位感染亚型是HPV52型、HPV16型和HPV58型，分别占18.20%、13.05%和12.5%；宫颈锥切术后半年HPV转阴率为76.58%，单因素分析提示年龄、受教育程度、产次、病变程度、累及腺体和术后应用抗炎药与HPV转阴均无明显相关性，多因素分析提示术后性生活与HPV转阴存在相关性。 结论 CIN患者以HPV52、HPV16型和HPV58型感染为主，宫颈锥切术治疗CIN效果明显，术后性生活可能是影响HPV感染转阴的相关因素。
[关键词] 宫颈上皮内瘤变；人乳头状瘤病毒；宫颈锥切术；相关因素
[中图分类号] R737.33 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2014)12(b)-0066-03
人类乳头瘤病毒(human papillomavirus，HPV)有多种亚型，30多种和宫颈病变密切关联，相关报道指出不同地区HPV感染亚型各异，探讨宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia，CIN)患者HPV感染亚型特点对该病临床诊治有着重要的指导意义[1]。宫颈锥切术是目前治疗CIN的首选方法，术后转阴率>70%，仍有部分患者无法转阴[2]。本研究探讨CIN患者HPV感染亚型特点和宫颈锥切术后HPV感染转阴的相关因素。
1 资料与方法
1.1 一般资料
以2013年4月～2014年2月本院接受两癌筛查且HPV阳性的554例妇女为研究对象，年龄25～50岁，平均(42.6±4.2)岁。对其HPV基因分型进行检测，病例确诊CIN1级142例，CIN2级127例，CIN3级95例，经检查排除其他宫颈病变。
1.2 HPV检测
主要仪器PCR扩增仪和快速核酸分子杂交仪(潮州凯普生物化学有限公司)，试剂盒均由该凯普提供，采集好标本，按照操作说明严格执行，PCR步骤：高温95℃使DNA变性(氢键断裂，形成单链DNA，预变性时间设为3～5 min)，55℃下退火(引物和单链DNA结合，形成局部双链，退火时间30 s)，72℃延伸(Taq酶作用下，由3′端向5′端延伸，延伸时间1 kb需1 min)，如此循环30次，每循环一次DNA含量增加一倍，多次循环(30次)得到大量目标DNA，然后利用核酸分子杂交技术检测HPV亚型，对照HPV亚型分布图对检测对象进行判定。
1.3 相关因素研究
经病理确诊CIN2～3级的患者222例，CIN2～3级患者选择宫颈锥切术治疗，治疗后随访半年，统计该组HPV转阴情况，记录年龄、性生活、产次、病变程度、术后使用抗炎药等信息，分析影响该病转阴的相关因素。
1.4 统计学分析
应用SPSS 17.0软件学软件分析数据，计数资料用率(%)表示，采用单因素χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 CIN患者HPV感染亚型分布
HPV阳性544例，占检测人数的8.48%，前3位感染亚型为HPV52型、HPV16型和HPV58型，分别占18.20%、13.05%和12.5%，病理确诊364例，CIN1级142例，CIN2级98例，CIN2级累及腺体29例，CIN3级57例，CIN3级累及腺体38例，感染亚型分布情况见表1。
表1 CIN患者HPV感染亚型分布(n=544)
2.2 HPV感染转阴的相关因素
222例CIN2～3宫颈锥切术后半年转阴170例，转阴率为76.58%，单因素分析提示年龄、受教育程度、产次、病变程度、累及腺体和术后应用抗炎药与HPV转阴均无明显相关性，术后性生活与HPV转阴存在相关性(表2)，多因素分析见表3。
表2 HPV感染转阴相关因素分析(n=222)
表3 HPV感染转阴多因素分析
3 讨论
HPV是诱发宫颈类病变的主要原因，相关报道提示大多数宫颈上皮内瘤变均伴HPV，不及时治疗就会发展成宫颈癌，严重威胁女性健康[3-4]。HPV感染亚型种类繁多，分高危亚型和低位亚型，均与生殖系统感染疾病相关，研究指出持续性高危HPV感染是宫颈癌发生的主要因素[5]。宫颈细胞学筛查CIN病变仍存在局限性，HPV检测逐渐成为CIN检测的辅助手段，为该病的临床诊断和治疗提供了依据[6]。本研究应用PCR技术对本院接受两癌检查的6416名的HPV基因进行检测，结果提示前3位感染亚型HPV52型、HPV16型和HPV58型，不同地区检出HPV16型的概率不一，但均属较高水平[7]。HPV亚型的研究对临床使用疫苗有重要的指导意义，通过研究发现高危CIN患者HPV16亚型所占比例明显高于低危CIN，对病变程度可能存在预测作用[8-10]。HPV52型和HPV58型同样属于高危HPV亚型，两种亚型均是宫颈癌的主要诱因，相关研究指出不同地区，感染亚型存在差别，香港、广州地区以上述两种亚型为主[11]。
报道指出，CIN1患者感染和病变程度相对轻微，约70%的患者可自行转阴，CIN2～3感染患者病变相对严重，自行转阴率极低，一般需借助临床手段转阴[12]。宫颈锥切术在治疗CIN的转阴效果已经得到广泛肯定，但仍有部分患者未能及时转阴。本研究通过随访对相关因素进行了分析，结果提示术后性生活是影响转阴的可能性危险因素，年龄、受教育程度、产次、病情、累及腺体和术后抗炎药对转阴的影响均不显著。根据上述分析，认为院方要做好CIN患者的健康教育工作，告知其性生活对手术效果的影响，定期接受检测，确定转阴后逐渐才可逐渐恢复正常性生活。 (敖东 李梅桂)
[关键词] 宫颈上皮内瘤变；人乳头状瘤病毒；宫颈锥切术；相关因素
[中图分类号] R737.33 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2014)12(b)-0066-03
人类乳头瘤病毒(human papillomavirus，HPV)有多种亚型，30多种和宫颈病变密切关联，相关报道指出不同地区HPV感染亚型各异，探讨宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia，CIN)患者HPV感染亚型特点对该病临床诊治有着重要的指导意义[1]。宫颈锥切术是目前治疗CIN的首选方法，术后转阴率>70%，仍有部分患者无法转阴[2]。本研究探讨CIN患者HPV感染亚型特点和宫颈锥切术后HPV感染转阴的相关因素。
1 资料与方法
1.1 一般资料
以2013年4月～2014年2月本院接受两癌筛查且HPV阳性的554例妇女为研究对象，年龄25～50岁，平均(42.6±4.2)岁。对其HPV基因分型进行检测，病例确诊CIN1级142例，CIN2级127例，CIN3级95例，经检查排除其他宫颈病变。
1.2 HPV检测
主要仪器PCR扩增仪和快速核酸分子杂交仪(潮州凯普生物化学有限公司)，试剂盒均由该凯普提供，采集好标本，按照操作说明严格执行，PCR步骤：高温95℃使DNA变性(氢键断裂，形成单链DNA，预变性时间设为3～5 min)，55℃下退火(引物和单链DNA结合，形成局部双链，退火时间30 s)，72℃延伸(Taq酶作用下，由3′端向5′端延伸，延伸时间1 kb需1 min)，如此循环30次，每循环一次DNA含量增加一倍，多次循环(30次)得到大量目标DNA，然后利用核酸分子杂交技术检测HPV亚型，对照HPV亚型分布图对检测对象进行判定。
1.3 相关因素研究
经病理确诊CIN2～3级的患者222例，CIN2～3级患者选择宫颈锥切术治疗，治疗后随访半年，统计该组HPV转阴情况，记录年龄、性生活、产次、病变程度、术后使用抗炎药等信息，分析影响该病转阴的相关因素。
1.4 统计学分析
应用SPSS 17.0软件学软件分析数据，计数资料用率(%)表示，采用单因素χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 CIN患者HPV感染亚型分布
HPV阳性544例，占检测人数的8.48%，前3位感染亚型为HPV52型、HPV16型和HPV58型，分别占18.20%、13.05%和12.5%，病理确诊364例，CIN1级142例，CIN2级98例，CIN2级累及腺体29例，CIN3级57例，CIN3级累及腺体38例，感染亚型分布情况见表1。
表1 CIN患者HPV感染亚型分布(n=544)
2.2 HPV感染转阴的相关因素
222例CIN2～3宫颈锥切术后半年转阴170例，转阴率为76.58%，单因素分析提示年龄、受教育程度、产次、病变程度、累及腺体和术后应用抗炎药与HPV转阴均无明显相关性，术后性生活与HPV转阴存在相关性(表2)，多因素分析见表3。
表2 HPV感染转阴相关因素分析(n=222)
表3 HPV感染转阴多因素分析
3 讨论
HPV是诱发宫颈类病变的主要原因，相关报道提示大多数宫颈上皮内瘤变均伴HPV，不及时治疗就会发展成宫颈癌，严重威胁女性健康[3-4]。HPV感染亚型种类繁多，分高危亚型和低位亚型，均与生殖系统感染疾病相关，研究指出持续性高危HPV感染是宫颈癌发生的主要因素[5]。宫颈细胞学筛查CIN病变仍存在局限性，HPV检测逐渐成为CIN检测的辅助手段，为该病的临床诊断和治疗提供了依据[6]。本研究应用PCR技术对本院接受两癌检查的6416名的HPV基因进行检测，结果提示前3位感染亚型HPV52型、HPV16型和HPV58型，不同地区检出HPV16型的概率不一，但均属较高水平[7]。HPV亚型的研究对临床使用疫苗有重要的指导意义，通过研究发现高危CIN患者HPV16亚型所占比例明显高于低危CIN，对病变程度可能存在预测作用[8-10]。HPV52型和HPV58型同样属于高危HPV亚型，两种亚型均是宫颈癌的主要诱因，相关研究指出不同地区，感染亚型存在差别，香港、广州地区以上述两种亚型为主[11]。
报道指出，CIN1患者感染和病变程度相对轻微，约70%的患者可自行转阴，CIN2～3感染患者病变相对严重，自行转阴率极低，一般需借助临床手段转阴[12]。宫颈锥切术在治疗CIN的转阴效果已经得到广泛肯定，但仍有部分患者未能及时转阴。本研究通过随访对相关因素进行了分析，结果提示术后性生活是影响转阴的可能性危险因素，年龄、受教育程度、产次、病情、累及腺体和术后抗炎药对转阴的影响均不显著。根据上述分析，认为院方要做好CIN患者的健康教育工作，告知其性生活对手术效果的影响，定期接受检测，确定转阴后逐渐才可逐渐恢复正常性生活。 (敖东 李梅桂)